奥林巴斯CKX53细胞荧光观察显微镜，在观察过程中尽量缩短观察时间，避免长时间照射荧光样本。可将后方荧光挡板调至半遮挡状态，减少光损伤。

奥林巴斯CKX53细胞荧光观察显微镜

以下是使用奥林巴斯 CKX53 进行细胞荧光观察的具体内容：

奥林巴斯CKX53准备工作

仪器检查：取下显微镜的防尘罩，检查显微镜各部件是否正常，如光源能否正常发光、荧光滤光片是否在位且无损坏等。

样品准备：将带有荧光标记的细胞样本制备好，如细胞爬片经固定、通透、封闭等处理后，与相应的荧光抗体或荧光染料进行孵育，然后用缓冲液冲洗，最后可将其放置在载玻片上，用封片剂封片。若是细胞培养皿中的细胞，确保细胞状态良好且分布均匀。

选择荧光通道：根据所使用的荧光标记物的激发和发射波长，选择对应的荧光滤块或荧光通道。

奥林巴斯CKX53操作步骤

打开照明系统：打开显微镜后部的光源，确保照明系统正常工作，显微镜后部光源灯亮起。如果是汞灯，需要提前开启预热 5-10 分钟，以保证光源稳定。

放置样品：将细胞培养容器或载玻片平稳放置在显微镜的载物台上，使用标本适配器或夹具固定好，确保样品正确对齐。

取下物镜保护盖：取下显微镜载物台上的物镜保护盖，准备进行观察。

调整双目镜宽度：使用显微镜时，调整双目镜的宽度，使双眼能看到同一视场。

移动样品：转动显微镜右侧与载物台相连的手柄，将样品被观察部位移动到视场下。

粗调焦距：缓慢转动粗调旋钮，当视场内出现模糊的图像时，停止粗调。

微调焦距：改为转动微调旋钮，直到整个视场内出现清晰的图像。

准备荧光系统：从荧光照明器 CKX3 - RFA 上取下汞灯箱 U - LH100HG 或液体光导适配器 U - LLGAD，并插入用于反射荧光照明的光闸。

选择荧光镜组：握住并滑动荧光照明器的荧光镜组选择拉杆，将要用于观察的荧光镜组转入光路。

调节光路：更换相应的荧光滤光片，并调整光源至适合荧光观察的波长。

调节视场光阑：将 B - 激发荧光镜组转入光路，根据需要调节视场光阑，以获得最佳的荧光观察效果，减少杂散光。

奥林巴斯CKX53观察与记录

荧光观察：通过目镜进行观察，调节荧光光源的强度和光路，使荧光图像清晰、明亮、对比度合适。注意避免长时间观察导致荧光淬灭和细胞光损伤。

多通道观察（如有需要）：如果样本中使用了多种荧光标记物，可通过切换不同的荧光通道，分别观察不同荧光信号的分布和表达情况，并进行图像的叠加和分析。

图像记录：使用显微镜自带的数码相机或连接的电脑图像采集系统，对观察到的荧光图像进行采集和保存，合理设置曝光时间、增益等参数，以获取清晰、准确的图像。

奥林巴斯CKX53细胞荧光观察显微镜注意事项

荧光光源的使用：荧光光源如汞灯有一定的使用寿命，且频繁开关会缩短其寿命，打开后 20 分钟内不得关闭，关闭后 20 分钟之内不得打开。

防止荧光淬灭：在观察过程中尽量缩短观察时间，避免长时间照射荧光样本。可将后方荧光挡板调至半遮挡状态，减少光损伤。

样品保存：荧光标记的样品应尽快进行观察，避免长时间放置导致荧光信号减弱。