详细介绍
品牌 | OLYMPUS/奥林巴斯 | 产地类别 | 进口 |
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应用领域 | 医疗卫生,化工,生物产业,制药/生物制药,综合 |
奥林巴斯CKX53细胞荧光观察显微镜
以下是使用奥林巴斯 CKX53 进行细胞荧光观察的具体内容:
奥林巴斯CKX53准备工作
仪器检查:取下显微镜的防尘罩,检查显微镜各部件是否正常,如光源能否正常发光、荧光滤光片是否在位且无损坏等。
样品准备:将带有荧光标记的细胞样本制备好,如细胞爬片经固定、通透、封闭等处理后,与相应的荧光抗体或荧光染料进行孵育,然后用缓冲液冲洗,最后可将其放置在载玻片上,用封片剂封片。若是细胞培养皿中的细胞,确保细胞状态良好且分布均匀。
选择荧光通道:根据所使用的荧光标记物的激发和发射波长,选择对应的荧光滤块或荧光通道。
奥林巴斯CKX53操作步骤
打开照明系统:打开显微镜后部的光源,确保照明系统正常工作,显微镜后部光源灯亮起。如果是汞灯,需要提前开启预热 5-10 分钟,以保证光源稳定。
放置样品:将细胞培养容器或载玻片平稳放置在显微镜的载物台上,使用标本适配器或夹具固定好,确保样品正确对齐。
取下物镜保护盖:取下显微镜载物台上的物镜保护盖,准备进行观察。
调整双目镜宽度:使用显微镜时,调整双目镜的宽度,使双眼能看到同一视场。
移动样品:转动显微镜右侧与载物台相连的手柄,将样品被观察部位移动到视场下。
粗调焦距:缓慢转动粗调旋钮,当视场内出现模糊的图像时,停止粗调。
微调焦距:改为转动微调旋钮,直到整个视场内出现清晰的图像。
准备荧光系统:从荧光照明器 CKX3 - RFA 上取下汞灯箱 U - LH100HG 或液体光导适配器 U - LLGAD,并插入用于反射荧光照明的光闸。
选择荧光镜组:握住并滑动荧光照明器的荧光镜组选择拉杆,将要用于观察的荧光镜组转入光路。
调节光路:更换相应的荧光滤光片,并调整光源至适合荧光观察的波长。
调节视场光阑:将 B - 激发荧光镜组转入光路,根据需要调节视场光阑,以获得最佳的荧光观察效果,减少杂散光。
奥林巴斯CKX53观察与记录
荧光观察:通过目镜进行观察,调节荧光光源的强度和光路,使荧光图像清晰、明亮、对比度合适。注意避免长时间观察导致荧光淬灭和细胞光损伤。
多通道观察(如有需要):如果样本中使用了多种荧光标记物,可通过切换不同的荧光通道,分别观察不同荧光信号的分布和表达情况,并进行图像的叠加和分析。
图像记录:使用显微镜自带的数码相机或连接的电脑图像采集系统,对观察到的荧光图像进行采集和保存,合理设置曝光时间、增益等参数,以获取清晰、准确的图像。
奥林巴斯CKX53细胞荧光观察显微镜注意事项
荧光光源的使用:荧光光源如汞灯有一定的使用寿命,且频繁开关会缩短其寿命,打开后 20 分钟内不得关闭,关闭后 20 分钟之内不得打开。
防止荧光淬灭:在观察过程中尽量缩短观察时间,避免长时间照射荧光样本。可将后方荧光挡板调至半遮挡状态,减少光损伤。
样品保存:荧光标记的样品应尽快进行观察,避免长时间放置导致荧光信号减弱。
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