倒置显微镜扫描电镜对标记物的要求有哪些

　　徕卡倒置显微镜由于高分辨扫描电镜的间世，为用表面标记技术观察细胞表面形态和区别两类纫胞群与其表面形态相的机能提供了条件。用此技术方法可研究细胞表面抗原、受体的性质，分布及运动。

　　但由于倒置显微镜扫描电镜与透射电镜的成像原理不同，因此对免疫扫描电境术的标记物有些特殊要求。具体都有哪些要求呢?我们总结几点如下：

　　1.清晰、容易识别的形状。对透射电镜的标记物要求电子致密度高，扫描电镜的标记物电子密度不是重要问题，而形状是识别的重要因素。

　　2.化学性质稳定，在标本处理过程中不会被损坏品制备过程中能牢固地结合。

　　3.对细胞表面的固有亲合力差。

　　4.大小适宜：一般而言扫描电镜分辨率低于透射电镜，此外扫描电镜标本要金屑镀膜，这都影响样品表面结构的分辨。因此标记物若太小、结构过于微细，就不能与样品表面固有结构区别，但标记物过于大，又不能明确定出去面抗原位置，因此标记物大小要兼顾以上两方面。

　　5.如果样品以苯乙烯树脂做为包埋剂，徕卡倒置显微镜再行割断法做扫描电镜观察是十分方便的。因为苯乙烯聚合后，氧化丙烯及醋酸异戊酌等很容易将其溶解，多次更换溶剂便可将苯乙烯清除干净。因此，在制做透射电镜标本时，多做出几个包埋胶囊样品，待聚合后，按上述方法割断，将割断好的样品放在氧化丙烯中，约2小时后便可经酷酸异戊酷置换、临界点干燥。

　　如果徕卡倒置显微镜应用高分辨率扫描电镜，虽然效果不错，但因为对标记物的特殊要求，它也有一定的局限性。