培养箱内明场 荧光观察细胞运动数据分析设备

在培养箱内进行明场和荧光观察细胞运动，需要借助特定的仪器设备，并遵循一定的操作规范和注意事项，以确保能够准确、实时地捕捉到细胞的动态变化。以下是相关介绍：

主要设备及特点

箱内明场 / 荧光多孔板活细胞工作站：可在培养箱环境中连续对多孔板中的活细胞进行明场和荧光成像，通过移动镜头对多孔板内的细胞按区域依次成像，扫描结束后自动拼接成全板完整图像，避免挪动培养板对细胞生理的干扰。该设备支持远程监控和分析，硬件和电子器件能在 5-40°C 及 20-95% 的湿度环境下运行，兼容 6-384 孔多孔培养板、培养皿、T25-T225 培养瓶等多种透明培养容器。

全自动活细胞监控系统：可开放式地放在二氧化碳培养箱内，配备 4X、10X、20X 物镜，具有红、绿、蓝三色荧光通道及明场通道，可同时进行四个光通道的延时成像。采用科研级高感光 CCD，配有全自动电动载物台，能实现 Z 轴自动聚焦、自动荧光通道切换、自动高通量图像采集和叠加等功能，还可自主编辑并自动批量生成视频，自动生成多种分析数据。

这是一种小型化培养箱内荧光显微镜，支持 3 通道荧光，可通过 APP 远程监控，适合中小规模实验，能够在接近细胞生理环境下实时、动态追踪细胞运动。

观察方法及要点

明场观察：利用普通的透射光照明，直接观察细胞的形态、轮廓和运动情况。适用于观察细胞的整体形态、迁移、增殖等较为宏观的动态变化。在培养箱内进行明场观察时，要注意选择合适的光源强度和物镜倍数，以获得清晰的图像。

荧光观察：首先需要对目标细胞或分子进行特异性荧光标记，如用 CFSE 标记细胞 A，CellTracker Red 标记细胞 B，或者通过基因编辑让细胞表达荧光蛋白等。然后选择合适的荧光通道进行观察，可实时追踪细胞的运动、细胞间的相互作用以及分子的动态变化等。在荧光观察过程中，要注意控制荧光激发光的强度和时间，避免对细胞产生光毒性，影响细胞的正常运动和生理状态。

数据分析：结合时间序列的明场和荧光图像，可通过软件量化细胞运动的关键参数，如细胞的迁移速度、方向改变、运动轨迹等。例如，通过 TrackMate 插件可以追踪细胞的运动轨迹，分析细胞运动的速度和方向变化；利用 ImageJ 或 CellProfiler 等软件可以计算荧光信号的强度变化、共定位系数等，从而进一步了解细胞运动与细胞内分子变化的关系。