培养箱内细胞定时连续荧光成像的数据分析与可视化观察,对于研究细胞的动态行为和生理过程至关重要。以下是相关介绍:
数据分析
细胞生长与增殖分析:可以基于明场或荧光图像自动计算细胞融合度并生成生长曲线,还能自动计算荧光通道每孔的平均荧光强度,以此了解细胞的增殖情况。如 JuLI™ Stage 的标配软件就能根据测得的细胞融合度自动生成曲线,量化细胞迁移率,更加准确地显示细胞迁移率的变化。
荧光细胞计数:使用细胞计数模块,对荧光染色细胞进行计数,可通过改变荧光强度及其他参数来优化结果,从而确定细胞数量的变化。
荧光强度分析:通过分析荧光强度水平,量化 GFP、RFP 和 DAPI 通道中图像的平均荧光强度,了解荧光标记的分子或结构的表达水平和变化趋势。
细胞行为追踪:结合时间序列荧光图像,通过软件量化细胞相互作用的关键参数,如接触频率、接触时长、距离变化等,还可分析细胞的运动轨迹,了解细胞的迁移速度、方向改变等行为。
共定位分析:同时采集明场和多个荧光通道图像,通过软件叠加分析细胞间的空间关系,计算两种荧光信号的重叠程度,即共定位系数,以确定不同分子或结构在细胞内的共定位情况。
可视化观察
延时摄影视频制作:使用相关软件,如 JuLI™ Stage 标配的 EDIT 软件,可以创建各种类型的延时摄影视频,包括单个视频编辑、视频拼接和视频矩阵,将细胞的动态变化过程以视频的形式直观地展示出来,可还原到任何想要观察的时间点,实现随时、连续地观察细胞形态变化、生长状态和运动过程。
图像编辑与处理:可以对单个图像或所有图像的亮度和对比度等设置进行编辑,优化图像质量,以便更好地观察细胞结构和荧光信号。
数据可视化呈现:通过绘制图表,如生长曲线、荧光强度曲线等,将数据分析的结果以直观的图表形式呈现,便于直观地比较和分析不同条件下细胞的变化趋势。
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