奥林巴斯体视显微镜SZ61观察水中浮游生物

使用奥林巴斯体视显微镜 SZ61 观察水中浮游生物时，需结合其格里诺光学系统的高景深、宽视场特性，以及浮游生物的动态观察需求。以下为针对性操作指南与分析要点：

一、样品采集与预处理：保持生物活性

采样策略

表层水采集：使用 25 号浮游生物网（孔径 64μm）在水面下 0.5 米处呈 “∞" 形缓慢拖动 1-2 分钟，浓缩样品至 50mL 标本瓶。

分层采样：深水湖泊需用采水器分表层、中层、底层取样，标记深度（如 “5m 层"）。

样品固定与浓缩

临时观察：直接取 10mL 水样，静置 5 分钟待生物沉降，用移液枪吸取底部 2mL 至载玻片（避免搅动）。

固定保存：若需长期观察，加入 1-2 滴鲁哥氏液（Lugol's solution）固定（每 100mL 水样加 5mL），避光静置 24 小时后虹吸去除上清液，留 5mL 沉淀。

制片技巧

载玻片制备：在载玻片中央滴 1 滴样品，覆盖 22mm×22mm 盖玻片（先接触一侧再缓慢放下，避免气泡）。

防样品流动：若生物游动过快，可在盖玻片四周涂少量凡士林，或加入 1% 甲基纤维素溶液减缓运动。

二、SZ61 显微镜参数设置：优化动态观察

光路与照明

模式选择：透射光（SZ2-ILST 环形底光）为主，可调光阑控制亮度（40%-60%），避免强光导致生物避光或死亡。

对比度增强：开启斜射光（通过底光转盘调节角度至 30°），利用格里诺系统的立体感突出浮游生物轮廓（如硅藻的壳纹、轮虫的附肢）。

放大倍率策略

初筛：10× 目镜 + 0.5× 辅助物镜（总 6.7×-45×），快速扫描全视野，记录优势类群（如绿藻、枝角类）。

精观：切换 15× 目镜（总 10×-67.5×）或 2× 辅助物镜（总 20×-135×），观察细节（如桡足类的触角分节、硅藻细胞壁的孔纹）。

动态追踪技巧

开启载物台移动尺的微调功能（最小步距 0.1mm），跟随快速游动的生物（如草履虫）。

使用视频录制功能（搭配 DP27 相机），后期逐帧分析运动轨迹或行为模式。

三、分类观察要点：常见浮游生物识别

类群形态特征（SZ61 下典型表现）观察重点

硅藻（Bacillariophyta）细胞壁呈对称壳状，具细密孔纹（如羽纹硅藻的纵沟），运动时呈直线滑行壳面花纹（属种鉴定关键）、色素体颜色（黄绿 / 褐色）

绿藻（Chlorophyta）球形 / 盘形，含绿色叶绿体（如栅藻的片状叶绿体、衣藻的眼点）鞭毛数量（衣藻 2 根）、群体排列方式（空球藻呈空心球体）

轮虫（Rotifera）身体分头部、躯干、尾部，头冠具纤毛环（运动时如旋转车轮）咀嚼器形态（槌型 / 枝型）、趾部结构（锚状 / 爪状）

枝角类（Cladocera）身体侧扁，被两瓣甲壳包裹，第二触角发达呈枝状（如溞属）颈沟位置、壳刺数量（溞属后背角有壳刺）

桡足类（Copepoda）身体分节明显，第一触角细长（雄体呈执握状），尾叉对称体节比例（前体部与后体部界限）、卵囊形态

四、操作技巧与注意事项

快速计数法

采用 “网格计数法"：在目镜中放置 10×10 网格测微尺，随机选取 5-10 个视野计数，取平均值后换算成单位体积数量（个 / L）。

避免生物聚集

若样品中生物密度过高（视野内＞50 个），可用过滤后的原水稀释 1-5 倍，确保单个生物清晰可见。

环境控制

样品温度维持在 15-25℃（可使用加热载物台），避免温差导致生物活力下降。

观察时间不超过 30 分钟，防止盖玻片下氧气耗尽（必要时可通过显微注射针补充空气）。

五、典型案例：湖泊浮游生物群落分析

样品：某富营养化湖泊表层水，经鲁哥氏液固定后取 1mL 制片。

观察：10× 目镜 + 1× 物镜（总 16×）下可见大量绿色球形群体（空球藻，约 200 个 /mL）、少量透明甲壳类（老年低额溞，5 个 /mL），以及硅质壳面反光的舟形硅藻（150 个 /mL）。

结论：绿藻占优势，提示水体轻度富营养化，溞类数量较少可能与藻类密度过高有关。

通过 SZ61 的高景深与宽视场优势，可实现浮游生物的活体动态观察、分类鉴定及定量分析，适用于生态学调查、水质监测及教学研究场景。操作时需注意保持生物活性，并结合分类特征逐步细化观察。