日本奥林巴斯生物教学显微镜BX53的应用技术

日本奥林巴斯生物教学显微镜 BX53 的应用技术如下：

奥林巴斯BX53明场观察技术

样品准备：对于细胞样品，可将细胞培养在载玻片上制成细胞爬片；对于组织样品，通常切成薄片，厚度一般在 5-10 微米，然后进行常规的苏木精 - 伊红（HE）染色等，以便更好地观察细胞和组织的形态结构。

操作要点：选择合适的物镜，一般先从低倍物镜如 4 倍或 10 倍开始，将样品清晰对焦后，再根据需要切换到高倍物镜。调节聚光器的高度和孔径光阑的大小，以获得最佳的光照强度和对比度，使图像清晰、细节丰富。

奥林巴斯BX53暗场观察技术

样品要求：适用于观察未染色且透明的微小物体，如细菌、细胞内的颗粒等。

操作要点：需要更换为暗场聚光镜，如 U-DCD 干式暗场聚光镜或 U-DCW 油式聚光镜。将聚光镜的光阑调至合适大小，使光线以倾斜角度照射到样品上，只有被样品散射的光线才能进入物镜，从而使样品在黑暗的背景下呈现明亮的轮廓，可观察到微小结构和折射率的差异。

奥林巴斯BX53相差观察技术

样品特点：主要用于观察未经染色的活细胞或透明的生物标本，如培养中的细胞、原生动物等。

操作要点：使用 uplfln - ph 或 pln - ph 系列相差物镜以及 u - pcd2 相差 / 暗场聚光镜。通过调节相差环的位置，使直射光和衍射光之间产生光程差，从而将样品的密度和厚度差异转化为可观察的光强变化，增强图像对比度，能清晰看到细胞内部的细胞器、细胞核等结构。

奥林巴斯BX53荧光观察技术

样品处理：对目标生物分子或结构进行荧光标记，如用荧光染料标记细胞中的特定蛋白质、核酸等，或者利用转基因技术使细胞表达荧光蛋白。

操作要点：选择合适的荧光激发块，确保与所使用的荧光染料或荧光蛋白的激发和发射波长匹配。打开荧光照明光源，调节激发光的强度和曝光时间，以获得清晰、明亮且无背景干扰的荧光图像。可同时对多种染色的标本进行成像，通过切换荧光滤色镜组，观察不同荧光标记的结构或分子。

奥林巴斯BX53微分干涉（DIC）观察技术

样品类型：广泛应用于观察细胞、组织切片等具有三维结构的生物样品，特别是对于细胞内的细胞器、细胞核等结构的观察效果较好。

操作要点：需要配备 DIC 光学组件，包括 DIC 棱镜等。调节 DIC 棱镜的角度和位置，使两束偏振光在样品上产生干涉，从而产生具有立体感的图像，可清晰地观察到样品的细微结构和形态变化，呈现出类似浮雕的效果，能更好地了解样品的三维结构信息。

奥林巴斯BX53偏光观察技术

样品特性：适用于观察具有双折射特性的生物材料，如牙齿、骨骼、肌肉、神经组织、肌动球蛋白纤维和有丝分裂的纺锤体等。

操作要点：安装偏光附件，如偏光镜、补偿器等。将样品放置在载物台上，使光线通过起偏器变成偏振光，然后穿过样品，再通过检偏器进行观察。通过旋转载物台和调节补偿器，可以观察到样品在不同角度下的双折射现象，分析样品的晶体结构和分子取向等信息。