使用奥林巴斯进口显微镜 CKX53 观察组织切片一般有以下步骤:
前期准备
熟悉显微镜操作:了解 CKX53 显微镜的各个部件及其功能,如光源调节旋钮、粗细准焦螺旋、物镜转换器、载物台调节旋钮等。
检查显微镜:确保显微镜的光源工作正常,亮度可调节。检查物镜和目镜是否干净,如有灰尘或污渍,需用专用的擦镜纸轻轻擦拭干净。
准备切片:从切片盒中取出需要观察的组织切片,检查切片是否完整、无破损,切片上的组织是否有脱落等情况。确保切片已经过合适的染色处理,如常用的 HE 染色,以便于观察细胞和组织的形态结构。
显微镜操作与观察
放置切片:打开显微镜载物台的压片夹,将组织切片平稳地放置在载物台上,使切片上的组织部位正对着通光孔中心,然后轻轻合上压片夹,固定切片。
低倍镜观察
调节光源:打开光源开关,通过调节亮度旋钮,使光线强度适中。一般来说,开始观察时,光线不宜过强,以免影响对组织形态的整体判断。
粗调焦距:转动粗准焦螺旋,使载物台上升,同时从侧面观察物镜与切片的距离,直到物镜接近切片,但不要接触到切片,避免压碎切片或损坏物镜。然后通过目镜观察,反向转动粗准焦螺旋,使载物台缓慢下降,直到能看到组织切片的大致图像。
微调焦距:使用细准焦螺旋进行微调,使图像更加清晰。在低倍镜下对整个组织切片进行全面观察,了解组织的整体结构、形状、大小,以及病变组织在整个切片中的大致位置和范围,确定需要进一步观察的区域。
中倍镜观察
转换物镜:在低倍镜下找到感兴趣的区域后,将其移至视野中央,然后轻轻转动物镜转换器,将低倍物镜转换为中倍物镜,通常为 20 倍物镜。
重新调焦:转换物镜后,由于不同物镜的焦距略有差异,可能需要再次微调细准焦螺旋,使图像清晰。在中倍镜下可以更清楚地观察组织的层次结构、细胞的排列方式、组织与组织之间的关系等,进一步确定病变的具体部位和特征。
高倍镜观察
再次转换物镜:将中倍镜下观察到的重点区域移至视野中央,转动物镜转换器,换用高倍物镜,一般为 40 倍或更高倍数的物镜。
精细调焦:高倍镜下视野变小,图像放大倍数更高,此时只需轻微转动细准焦螺旋,就能使图像达到最佳清晰状态。在高倍镜下仔细观察细胞的形态、大小、细胞核的形态、染色质的分布、细胞质的颜色和质地等细节,分析细胞是否存在异常变化,如细胞形态的改变、细胞核的增大或缩小、核仁的明显程度等,判断组织是否存在病变以及病变的类型和程度。
观察记录与结束工作
记录观察结果:可以使用显微镜自带的图像采集系统对典型的观察图像进行拍摄保存,也可以通过手绘的方式,绘制出观察到的组织细胞形态和病变特征,并标注出关键结构和病变部位。同时,在实验记录本上记录下观察到的主要现象、病变特征、切片编号等信息,以便后续的分析和总结。
整理显微镜:观察结束后,关闭显微镜光源开关,将物镜转回到低倍镜位置,松开压片夹,取下切片,将切片放回切片盒中妥善保存。用擦镜纸将物镜和目镜擦拭干净,如有必要,可使用少量的二甲苯等有机溶剂擦拭沾有油渍或污渍的镜头,但要注意擦拭后及时用干净的擦镜纸擦干,防止溶剂残留损坏镜头。
清理台面:清理显微镜载物台和周围的杂物,保持实验台面整洁干净。
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